1. 根据实验设计，将表达SEAP报告基因的细胞铺于96孔或384孔反应板。如细胞培养基中含有FBS，应使用56℃，30分钟灭活的FBS以灭活FBS中可能含有的碱性磷酸酶。
2. 根据实验要求对细胞进行化合物处理及报告基因刺激。
3. 于报告基因刺激后适当时间，例如24～48小时，收集细胞上清液，进行SEAP活性检测。
4. 实验前将QT-BlueTM 分泌型碱性磷酸酶检测试剂平衡至室温，轻摇混匀。缓冲液浓缩液可能呈现微浊状，无沉淀，可适当加温，混匀后稀释使用。
5. 根据需要量配制对应体积的1x反应液。试剂盒中的底物为250x，缓冲液为40x，使用前用无菌纯水将缓冲液配成1x缓冲液，再用1x缓冲液将底物稀释成1x反应液。
6. 向96-孔透明检测板每孔加入20 ml检测样本或对照样本，再向各孔加入180 ml检测试剂。
7. 在振板机上振荡15秒钟。
8. 37℃温育10～60分钟，或室温30～180分钟。
9. 在分光光度计上读取可见光吸光度，波长为600～650nm。
